Immunfluoreszenz

Material und Methode

Gegen die Partikel aus positiven Kulturen wurden Antikörper hergestellt und mit FITC konjugiert. Charakteristika des Konjugates „Anti – Ca“ : 12,2 mg/ml Protein;  Mol FITC/Mol Protein = 1 : 10, Arbeitstiter 1: 32, verdünnt in phosphatgepufferter Kochsalzlösung (pH = 7,2) mit Zusatz von 15 mM Natriumazid. Untersucht wurden Gefrierschnitte von Solidtumoren und Blutausstriche von 18 Tumorpatienten und 10 Kontrollen. Der Nachweistiter betrug 1:128, Waschdauer 30 min, Auflichtfluoreszenz. Für die Herstellung des Konjugates „ Anti – Ca“ habe ich Herrn Dr. Miroslav Ceska zu danken.

Kontrollen:

1. FITC 1 : 10 000 in phosphatgepufferter Kochsalzlösung (pH = 7,2) mit Zusatz von 15 mM Natriumazid.
2. Inkubation mit „Anti-Ca“ 43 mg Protein/ml, 30 min., waschen, 30 min Inkubation mit FITC- konjugiert Anti – Ca wie vorher.
3. Diverse Normalgewebe.

Ergebnisse

Alle Blutausstriche und Gefrierschnitte von Solidtumoren waren positiv (siehe Abb.12, Abb.13, Abb.14).  Bei den Kontrollen war ein Fall mit chronischer Tonsillitis positiv, alle anderen negativ.

Abb. 12 Gefrierschnitt Magen- Karzinom, Auflichtfluoreszenz, Partikel (Basoplasma sanguineum)  fluoreszieren hell,  Titer 1: 128

Abb. 13 Gefrierschnitt Rectum - Karzinom, Auflichtfluoreszenz, Partikel (Basoplasma sanguineum) fluoreszieren hell, Titer 1: 128

Abb. 14  Gefrierschnitt Mamma -Karzinom, Auflichtfluoreszenz, Partikel (Basoplasma sanguineum) fluoreszieren hell,  Titer 1: 128. Foto mit besserer Auflösung

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